수은은 지각에 자연적으로 존재하는 금속으로써 지각 및 대기활동뿐만 아니고 인간의 산업활동 등을 통해 수중에 방출된다. 이렇게 방출된 무기형태의 수은은 장기간 수중생태계에 이동·축적되며 수중 생물의 영양단계를 통해 유기형태인 메틸수은으로 전환된다. 이 메틸수은은 육식성 어류의 먹이 활동과 같은 상위영양단계를 통해 생물학적으로 농축된다. 또한 인간은 이들 어류의 섭취를 통해 메틸수은에 노출된다(UNEP, 2002). 이와 같이, 어류섭취를 통한 수은 노출의 위험성으로 인해 미국은 1990년대부터 어류의 수은 함량을 모니터링 해오고 있으며(US FDA, 2010), 유럽은 수은에 대한 기준(maximum tolerated level, ML)을 0.5 mg/kg (어류), 1.0 mg/kg (육식성어류)로 설정하여 관리하고 있다(EC, 2008). 이외의 국가로, 호주와 뉴질랜드(FSANZ, 2004)는 최대허용기준(maximum permissible level, MPL)를 설정하였으며, 캐나다(Health Canada, 2007)와 일본(JETRO, 2011) 역시 가이드라인을 제시하였다.
어류와 수산물에 대한 주기적인 섭취는 메틸수은의 식이노출(dietary exposure)과 밀접한 관계가 있으며 이로 인해, EFSA(European food safety authority)는 주간허용섭취량(tolerable weekly intake)을 설정하여 소비자에게 권고하고 있다(EFSA, 2012). 최근 EFSA는 메틸수은에 대한 주간허용섭취량을 기존 1.6 μg/kg body weight에서 약 19% 감소된 1.3 μg/kg body weight로, 기존 총수은에 대한 주간허용섭취량(5 μg/kg body weight)을 철회하고 무기수은에 대한 주간허용섭취량을 4 μg/kg body weight로 강화하여 제안하였다(EFSA, 2012).
수산물섭취(어류, 어류가공품, 연체류, 갑각류 등)는 다른 국가들에 비해 아시아에서 상대적으로 높으며 지속적으로 증가되어왔다(York and Gossard, 2004). 우리나라의 1인 1년 수산물섭취량은 59.6 kg으로 일본(52.2 kg/년), 말레이시아(57.1 kg/년)와 함께 상대적으로 높은 국가로 나타났다(NOAA, 2014). 또한 2012년 국민영양통계에 따르면, 어패류 섭취비율은 전체식품의 3.4%, 동물성 식품의 16.8%로 나타났다(MW, 2014). 따라서 우리나라는 수산물 섭취를 통한 유해물질의 인체 노출 평가와 위해 평가가 중요하다. 특히 어류의 경우, 식습관(Dietary-habits)의 다양성으로 인해 어류 부위별 유해물질분석과 그 결과를 바탕으로 식이노출에 의한 위해 평가가 필요하다.
이에 본 연구에서는 우리나라 양식산 어류의 부위별 총수은 함량을 분석하였으며 우리나라뿐만 아니라 외국의 허용기준과 비교하여 오염도를 평가하였다. 또한 양식 해수종과 담수종에 대한 부위별 총수은 농도 분포의 유의성을 검증하였으며 이상의 결과를 토대로 양식산 어류의 섭취를 통한 총수은의 주간추정섭취량을 산출하여 안전성 평가를 수행하였다.
시료는 2014년 7월부터 8월에 걸쳐 전국 23개 시·도, 57개 양식장으로부터 총 212개 시료를 채취하여 분석에 사용했다(Fig. 1). 이물질 등의 제거를 위해 물로 3회 세척 후 체장과 무게를 측정하였다. 각 시료들은 해부용 가위와 해부용 칼을 이용하여 근육, 아가미, 간을 분리한 후 이차오염을 막기 위해 표면에 묻어있는 혈액을 제거하였으며 균질기(Plytron, PT-MR 3100D, Kinematica, Switzerland)를 이용하여 균질화 하였다. 분석 결과의 재현성을 위해 균질화시킨 시료들은 분석 전까지 -20°C에 보관하였다. 시료준비에 사용된 물은 18 MΩcm수준의 초순수를 사용하였으며 기구 및 용기는 모두 1% (v/v) HNO3로 세척하여 사용하였다.
약 0.1 g의 균질화된 시료는 골드아말감법을 이용한 직접수은 분석기(DMA-80, Milestone, Milano, Italy)를 사용하여 3회 분석하였다. 공시료(blank), 검량표준물질(calibration standards), 그리고 인증표준물질(CRM; certified reference materials) 역시 함께 분석하였다. DORT-4 (n=30) (Dogfish Liver; NRC-CNRC, Ottawa, Ontario, Canada)와 DORM-4 (n=28) (Fish protein; NRC-CNRC, Ottawa, Ontario, Canada)는 총수은 분석의 정확성 및 재현성 확인을 위하여 사용하였다. 어류의 부위별 총수은 함량은 mg/kg, 생체중량으로 나타냈다. 총수은 분석을 위한 기기조건은 건조를 650°C에서 90초, 분해는 650°C에서 180초, 그리고 아말감화(Amagamation)는 850°C에서 12초로 설정하였다. 모든 결과는 Easy-DOC3프로그램(Easy-DOC3 for DMA, Ver. 3.30, Milestone, USA)을 이용하여 산출하였다.
위해도 평가를 위한 양식산 어류의 총수은에 대한 주간추정섭취량(Estimated Weekly Intake)은 조사된 총수은 함량과 국민건강영양조사 제5기 3차년도 영양조사부문에 근거한 2012년 국민영양통계로부터 산출하였다(MW, 2013; MW, 2014). 이를 근거로 다음과 같은 수식을 통해 산출하였다.
Estimated Weekly Intake=(mean content of total mercury×daily food intake×7days)/63.5 kg (adult mean body weight)
산출된 주간추정섭취량으로부터 FAO/WHO의 합동 식품 첨가물전문가위원회(JECFA)에서 설정한 무기수은 잠정주간섭취허용량(PTWI, 4 μg/kg body weight)에 대한 주간추정섭취량의 % 비율(% of PTWI)을 산출하여 위해도를 평가하였다.
모든 결과는 평균(Mean)과 표준편차(SD)로 나타냈으며 그룹간의 유의적인 차이를 확인하기 위해 일원배치분산분석(One-way ANOVA), 독립표본 T-검정(T-test)를 수행하였다(SAS version 9.2, SAS Institute, Cary, NC, USA) (
총수은 분석의 정확성 및 재현성 확인을 위하여, 2개의 인증표준물질을 사용하여 회수율을 확인하였다(Table 1). 그 결과, DOLT-4와 DORM-4의 회수율은 각각 100.9%, 99.0%로 나타났다. 어류 유래 인증표준물질(DOLT-4; Dogfish liver, DORM-4; Fish protein)의 회수율은 약100%로 나타났으며 이 수치는 AOAC guideline 부합하는 것으로 나타났다(AOAC International, 2002). 따라서 본 연구의 분석 대상인 양식산 어류에 대한 총수은 분석 결과는 높은 신뢰성을 가질 것으로 사료된다. 전국 23개 시·도, 57개 양식장으로부터 채취된 총 212개 시료에 대한 부위별 총수은 분석 결과는 Table 2에 나타냈다. 부위별 평균 총수은 함량분포는 해수종에서 근육 0.036-0.111 mg/kg (wet weight), 아가미 0.008-0.017 mg/kg, 간 0.010-0.060 mg/kg으로 나타났으며 담수종에서 근육 0.026-0.162 mg/kg, 아가미 0.004-0.039 mg/kg, 간 0.011-0.121 mg/kg으로 나타났다. 총수은 함량은 해수종 red sea bream (
[Table 1.] Recovery of certified reference materials (CRM)
Recovery of certified reference materials (CRM)
Tissue-specific total mercury concentrations, length, weight for farmed marine and freshwater fishes in Korea
비록 양식산 어류의 총수은 함량이 우리나라 및 EU의 총수은 기준치(0.5 mg/kg)에 비해 낮은 수치를 나타냈지만 잠재적인 위해도 평가를 위해 수은 주간추정섭취량을 식품첨가물전문가위원회(JECFA)에서 설정한 무기수은 잠정주간섭취허용량(PTWI)과 비교하였다. 위해도 평가를 위한 양식산 어류의(근육) 총수은 함량에 대한 주간추정섭취량(estimated weekly intake)은 국민건강영양조사 제5기 3차년도 영양조사부문에 근거한 2012년 국민영양통계 자료를 통해 산출하였다. 위해도 평가 결과, 총수은에 대한 주간추정섭취량은 trout (
The estimated weekly intake of farmed marine and freshwater fishes compared with the PTWI set by JECFA
이상의 결과를 요약하면, 총수은 함량은 해수종red sea bream(